共表達HIV－1CNB結構蛋白與hIL－6的重組雞痘病毒活載體疫苗
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公開(公告)號
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CN1490052A
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公開(公告)日
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2004.04.21
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申請(專利)號
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CN02133236.3
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申請日期
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2002.10.18
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專利名稱
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共表達HIV－1CNB結構蛋白與hIL－6的重組雞痘病毒活載體疫苗
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主分類號
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A61K39/275
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分類號
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A61K39/275;A61P31/12
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分案原申請?zhí)? |
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優(yōu)先權
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申請(專利權)人
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中國人民解放軍軍需大學軍事獸醫(yī)研究所
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發(fā)明(設計)人
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金寧一;江文正;李子健;張立樹;金洪濤
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地址
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吉林省長春市西安大路175號
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頒證日
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國際申請
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進入國家日期
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專利代理機構
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吉林長春新紀元專利代理有限責任公司
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代理人
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白冬冬
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國省代碼
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吉林;22
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主權項
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一種共表達HIV-1CNB結構蛋白與hIL-6的重組雞痘病毒活載體疫苗，其特征在于：該疫苗提供三株共表達中國流行株I型人免疫缺陷病毒B亞型(HIV-1CNB)結構蛋白與細胞因子人白細胞介素6(hIL-6)的重組雞痘病毒vPUTAIL6-GAG、vPUTAIL6-GP和vPUTAIL6-GE，它們分別共表達HIV-1CNB核心蛋白gag、外膜蛋白gp120或gag-gp120嵌合蛋白與hIL-6，該三株重組病毒均可刺激機體產生抗HIV-1的特異性體液免疫和細胞免疫。2、根據權利要求1所述的共表達HIV-1CMB結構蛋白與hIL-6的重組雞痘病毒活載體疫苗的構建方法，其特征在于：將HIV-1CNB核心蛋白gag基因和外膜蛋白gp120基因以及二者嵌合后，分別插入到雞痘病毒表達載體pUTAL復合啟動子ATI-P7.5×20下游，同時將細胞因子hIL-6插入到串聯(lián)啟動子P7.5×16下游，構建含HIV-1CNB gag、gp120或gag-gp120嵌合基因和hIL-6基因的重組雞痘病毒表達質粒；將構建的重組質粒與雞痘病毒株在雞胚成纖維細胞內進行同源重組，并用5-溴脫氧核糖尿苷(BUdR)進行加壓篩選；重組病毒分別經PCR、Western blot和免疫熒光試驗進行檢測，篩選陽性重組雞痘病毒；將篩選的陽性重組雞痘病毒分別免疫BALBc小鼠并進行免疫學指標的檢測。
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摘要
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一種共表達HIV-1CNB結構蛋白與hIL-6的重組雞痘病毒活載體疫苗，屬于生物技術領域。該疫苗提供三株共表達中國流行株I型人免疫缺陷病毒B亞型(HIV-1CNB)結構蛋白與細胞因子人白細胞介素6(hIL-6)的重組雞痘病毒vPUTAIL6-GAG、vPUTAIL6-GP和vPUTAIL6-GE，它們分別共表達HIV-1CNB核心蛋白gag、外膜蛋白gp120或gag-gp120嵌合蛋白與hIL-6，該三株重組病毒均可刺激機體產生抗HIV-1的特異性體液免疫和細胞免疫。本發(fā)明得到的三株重組雞痘病毒對實驗動物是安全的，無任何病理現象出現。具有很好的遺傳穩(wěn)定性，經多次傳代后外源基因不丟失，且可在非禽屬動物(如哺乳動物)細胞中表達外源蛋白。所使用的目的基因為中國流行株HIV-1 B亞型的結構蛋白基因，從而構建的重組雞痘病毒可作為我國預防和治療AIDS的活載體疫苗。本發(fā)明中重組雞痘病毒表達的細胞因子hIL-6起到了免疫佐劑的作用。
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國際公布
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