公開(公告)號 | CN1488761A |
公開(公告)日 | 2004.04.14 |
申請(專利)號 | CN03142232.2 |
申請日期 | 2003.08.13 |
專利名稱 | 一類雙鏈RNA分子及其在制備抑制乙型肝炎病毒復制藥物中的應用 |
主分類號 | C12P19/34 |
分類號 | C12P19/34;C12N15/70;A61K31/7088;A61P1/16;A61P31/12 |
分案原申請?zhí)? | |
優(yōu)先權 | |
申請(專利權)人 | 復旦大學;上海恒達科技發(fā)展股份有限公司 |
發(fā)明(設計)人 | 錢志康;宣寶琴;徐劍鋒;李琳 |
地址 | 200433上海市邯鄲路220號 |
頒證日 | |
國際申請 | |
進入國家日期 | |
專利代理機構 | 上海正旦專利代理有限公司 |
代理人 | 陸飛 |
國省代碼 | 上海;31 |
主權項 | 一種利用大腸桿菌發(fā)酵制備用RNAi用ldsRNA和siRNA分子的方法,其特征在于包括構建ldsRNA表達載體,并轉(zhuǎn)化大腸桿菌宿主菌,通過大規(guī)模發(fā)酵,用堿-SDS法抽提發(fā)酵菌體得到全RNA和質(zhì)粒DNA的混合物;該混合物用CF-11柱進行純化得到ldsRNA,并利用大腸桿菌RNase III將ldsRNA切成12-30bp的siRNA。 |
摘要 | 本發(fā)明屬于分子生物學與生物醫(yī)藥技術領域,具體為一種利用大腸桿菌發(fā)酵制備RNA干擾用雙鏈RNA分子或小干擾RNA分子的方法,并將這些RNA分子用于制備治療乙型肝炎的藥物。將本發(fā)明得到的ldsRNA或siRNA以適當?shù)谋壤c乙型肝炎病毒表達載體混合,并用尾靜脈液壓法注射到小鼠體內(nèi)。結果顯示非同源性序列l(wèi)dsRNA和siRNA基本不抑制乙型肝炎病毒在小鼠體內(nèi)的復制,而與乙肝病毒基因同源性的ldsRNA和siRNA可以有效抑制乙型肝炎病毒在小鼠體內(nèi)的感染復制,抑制率高達90%以上。 |
國際公布 |