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目前對(duì)免疫球蛋白輕鏈和腎小球系膜內(nèi)的細(xì)胞外基質(zhì)，以及腎小管間質(zhì)性疾病進(jìn)行了研究，現(xiàn)介紹如下：
1．免疫球蛋白輕鏈在各型腎小球疾病中的分布 各種免疫球蛋白的重鏈，根據(jù)其結(jié)構(gòu)及抗原性的不同，而可分為IgG、IgA、IgM、IgE、IgD。輕鏈則僅有兩種類(lèi)型，即Kappa 及Lambda（κ輕鏈及λ輕鏈)。目前使用熒光素標(biāo)記之羊抗人κ及λ單克隆抗體，對(duì)人類(lèi)各型腎小球腎炎觀察輕鏈分布之情況。初步觀察結(jié)果為：系膜增生性腎小球腎炎、系膜毛細(xì)血管性腎小球腎炎、局灶性硬化性腎小球腎炎、膜性腎小球腎炎、狼瘡性腎炎時(shí)，κ與λ的輕鏈的沉積皆無(wú)明顯差異，而IgA腎病時(shí)主要為λ輕鏈沉積，淀粉樣變時(shí)則為大量κ輕鏈沉積。目前又有輕鏈性腎病的提法，常見(jiàn)于多發(fā)性骨髓瘤患者，可見(jiàn)有大量κ輕鏈沿腎小球底膜、腎小管基底膜、腎小球系膜區(qū)、小血管壁及間質(zhì)中沉積，實(shí)際上仍為類(lèi)似淀粉樣之病變。
2．細(xì)胞外基質(zhì)（ECM)的研究 腎小球中細(xì)胞外基質(zhì)的變化與腎小球硬化的發(fā)生有十分密切的關(guān)系，目前已受到重視而成為研究的重點(diǎn)。ECM是種多種成分形成的高度有序列的網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，主要包括膠原、糖蛋白及蛋白多糖三類(lèi)大分子物質(zhì)。
�。�1)膠原：ⅠⅡⅢ型膠原呈纖維束狀分布，Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型膠原呈纖維網(wǎng)狀分布。
�。�2)糖蛋白：起將細(xì)胞粘著于細(xì)胞外基質(zhì)的作用，主要包括纖維連接蛋白（fibronectin,FN)和層粘連蛋白（laminin, LN)。
�。�3)蛋白多糖：包括硫酸肝素、硫酸軟骨素、透明質(zhì)酸等。
從形態(tài)上，腎小球中ECM可分為系膜基質(zhì)和腎小球基底膜兩部分。近10余年來(lái)，ECM多種成份分離純化的成功，相應(yīng)抗體的制備，為利用免疫熒光或酶標(biāo)技術(shù)對(duì)研究腎小球ECM的組成和分布提供了有利條件。目前研究結(jié)果表明，系膜基質(zhì)及基底膜皆含有網(wǎng)狀的Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ型膠原，系膜基質(zhì)中含纖維連接蛋白較多，而基底膜中含層粘連蛋白較多，且硫酸肝素含量豐富。腎臟間質(zhì)中則主要為束狀的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型膠原。這些正常分布狀況在腎小球疾病時(shí)可發(fā)生變化。目前已證實(shí)，在系膜增生性腎小球腎炎時(shí)，系膜基質(zhì)中可出現(xiàn)Ⅰ型及Ⅲ型膠原，一般認(rèn)為由系膜細(xì)胞所產(chǎn)生。此外，如前所述，很多生物活性因子可對(duì)系膜細(xì)胞起作用，使其增殖并合成及分泌Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ型膠原、FN、LN及蛋白多糖，促進(jìn)ECM的增多，逐漸使腎小球發(fā)生硬化。應(yīng)用分子雜交免疫細(xì)胞化學(xué)技術(shù)，可對(duì)系膜細(xì)胞等探知相應(yīng)分子的mRNA表達(dá)，從而更深入地研究腎小球硬化的發(fā)生機(jī)制。
3．腎小管間質(zhì)性疾病 與免疫異常有關(guān)者有二種情況：
�。�1)腎小管間質(zhì)中免疫復(fù)合物沉積：常見(jiàn)于狼瘡性腎炎，可見(jiàn)IgG、IgM、IgA及C3呈顆粒狀沉積于腎小管基底膜、腎小管周?chē)?xì)血管壁或散在于腎間質(zhì)中。這種顆粒狀沉積還可見(jiàn)于腎移植排斥反應(yīng)。少數(shù)Sjogren 綜合征的少數(shù)混合性冷球蛋白血癥，也可見(jiàn)于特發(fā)性間質(zhì)性腎炎。
�。�2)抗腎小管基底膜抗體性腎小管間質(zhì)性疾�。涸贕oodpasture綜合征時(shí)，除可見(jiàn)沿腎小球基底膜有IgG呈連續(xù)線形熒光外，同時(shí)也可看到腎皮質(zhì)部的腎小管有IgG和C3呈連續(xù)線形沉積，最初常出現(xiàn)于近曲小管。這說(shuō)明體內(nèi)有抗腎小管基底膜抗體產(chǎn)生。此外，在一些藥物性間質(zhì)性腎炎、特發(fā)性間質(zhì)性腎炎或腎移植急性排斥反應(yīng)時(shí)也可見(jiàn)IgG及C3沿腎小管基底膜呈連續(xù)線形沉積。
二、免疫電鏡技術(shù)在腎臟疾病中應(yīng)用的意義
1．用以研究正常和病理狀態(tài)下腎小球的超微結(jié)構(gòu)成分及其變化 應(yīng)用免疫酶標(biāo)記的各種ECM成分的單克隆抗體，使用免疫電鏡觀察正常腎小球中各種結(jié)構(gòu)成分如各型膠原、纖維連接蛋白、層粘連蛋白、硫酸肝素等在基底膜和系膜區(qū)的分布狀況，并對(duì)比觀察在病理情況下出現(xiàn)的變化。這有助于深入了解腎臟疾病的時(shí)超微結(jié)構(gòu)成分的分布和數(shù)量變化。
2．探討腎臟疾病的病源 應(yīng)用免疫電鏡可清晰顯示乙肝病理在腎小球及腎小管的分布部位及數(shù)量，以及確定其在細(xì)胞內(nèi)之位置（胞漿內(nèi)或胞核內(nèi))和與在上皮下或內(nèi)皮下沉積之免疫復(fù)合物間的關(guān)系。目前并 可利用分子生物學(xué)技術(shù)鑒別乙肝病毒有無(wú)復(fù)制，從而深入探討乙肝病毒相關(guān)性腎炎的發(fā)病機(jī)制。
3．研究腎小球內(nèi)沉積之免疫復(fù)合物的組成成分及其形成過(guò)程 應(yīng)用不同大小膠體金顆粒標(biāo)記多種免疫球蛋白，以顯示腎小球中沉積的電子致密物質(zhì)（即免疫復(fù)合物)中各種免疫球蛋白的組成情況，以分析免疫復(fù)合物的組成成分。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，可動(dòng)態(tài)地觀察腎小球腎炎時(shí)免疫復(fù)合物的形成過(guò)程。例如在動(dòng)物的被動(dòng)性Heymann腎炎時(shí)觀察到特異抗體首先沉積于腎小球上皮細(xì)胞膜表面的有被小窩內(nèi)，進(jìn)一步聚集成帽，而后脫落至上皮下而成為上皮下沉積物的動(dòng)態(tài)過(guò)程。這有助于對(duì)腎小球腎炎發(fā)病機(jī)制的深入研究。
4．有助于正確評(píng)價(jià)免疫熒光的觀察結(jié)果 糖尿病性腎小球硬化病人的腎穿刺標(biāo)本，免疫熒光觀察顯示IgG沿腎小球毛細(xì)血管壁呈連續(xù)線形熒光。目前有人應(yīng)用免疫電鏡技術(shù)未能證實(shí)有相應(yīng)免疫球蛋白存在，這提示糖尿病時(shí)的免疫熒光陽(yáng)性結(jié)果可能為腎小球基底膜通透性增加而導(dǎo)致的非特異性沉積所致。
